科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。如图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下面的问题。
(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增,该技术须用________酶,所需的原料是________。
(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点(如下表):
限制酶 |
BamHⅠ |
Hind Ⅲ |
EcoR Ⅰ |
Sma Ⅰ |
识别序列及 切割位点 |
用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用Sma Ⅰ酶切割,原因是
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_________________________________________________________________。
图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用________酶对外源DNA、质粒进行切割。
(3)图中⑤、⑥依次表示组织培养过程中抗盐烟草细胞的________、________过程。
(4)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是___________________________________________________。
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