高二生物每课一练：1章 微生物培养技术

下列关于基因工程的叙述，错误的是(    )。

下列关于限制酶的说法正确的是(    )。

工程菌是指(    )。

一个双链DNA经一限制酶切割一次形成的黏性末端个数为(    )。

下表有关基因表达的选项中，不可能的是(    )。

在基因工程中，为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法，在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是(    )。

基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是(    )。
A．工具酶、目的基因、载体、受体细胞
B．重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶
C．模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞
D．目的基因、限制性内切酶、载体、受体细胞

干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血中只能提取0.5μg，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下方法(如图所示)生产干扰素。

从上述方式中可以看出该公司生产干扰素运用的方法是(    )。

在基因工程中，若受体细胞是细菌，则用来处理该细菌以增强细胞壁通透性的化学试剂是(    )。

下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。下列相关叙述中正确的是(    )。

上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍。标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。下列有关的叙述中，正确的是(    )。

基因工程与蛋白质工程的区别是(    )。

农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞采用最多的方法。下图为农杆菌转化法示意图，请据图回答问题。

(1)Ti质粒多存在于细菌中，它是能自我复制的________。
(2)获取外源基因(目的基因)需要限制酶的参与，而目的基因在重组过程中需要________酶的参与，并依据碱基________原则进行重组。
(3)Ti质粒原存在于________中，其上的TDNA具有可转移到受体细胞并整合到受体细胞的________上的特点，因此携带外源基因的DNA片段必须插入到________部位。
(4)农杆菌转化法适于将目的基因导入________和祼子植物，而不易于感染大多数________。
(5)若将相关的目的基因导入动物细胞或微生物细胞则常采用________和________。

2011年11月，武汉大学利用细菌将人的血清白蛋白基因导入水稻体内，借助水稻合成了人的血清白蛋白，这种蛋白质和人体自然产生的这类物质是完全一致的，这一成果轰动了生物界。结合图示回答转基因水稻培育过程的相关问题。

(1)限制酶Mun  Ⅰ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C^↓AATTG—和—G^↓AATTC—。为保证重组质粒表达载体的准确构建，应该怎样操作？______，________，________。
(2)②过程常用的细菌是________。
(3)③经历的生理过程主要有________和________两个阶段。培育出转基因水稻完整个体所依据的生物学原理是__________________________________。
(4)基因工程的最后步骤是目的基因的检测与鉴定，在此步骤可对培育的植株进行分子水平的检测，可检测的物质有______________、____________、______________。

已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

(1)实验步骤①所代表的反应过程是____________________________________。
(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用_____________________________________________________________。
(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能________，也不能______________。
(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用________与________进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。
(5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(选填“相同”或“不同”)，根本原因是_________________________________________________________________。

在DNA连接酶的催化下形成的化学键和位置分别是(    )。

从基因文库中获取目的基因的根据是(    )。

下列有关基因工程操作的叙述，正确的是(    )。

下列关于基因文库的说法，错误的是(    )。

下列关于DNA连接酶的叙述正确的是(    )。
①催化相同黏性末端的DNA片段之间的连接  ②催化不同黏性末端的DNA片段之间的连接  ③催化两个黏性末端互补碱基间氢键的形成  ④催化两个核苷酸之间的磷酸二酯键的形成

科学家在培育抗虫棉时，经过了许多复杂的过程和不懈的努力，才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中，然后导入棉花的受精卵中，结果抗虫基因在棉花体内没有表达。之后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端)，导入棉花受精卵，长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端)，导入棉花受精卵，结果长成的植株有了抗虫能力。那么作为重组的载体应具备的结构是(    )。

下列黏性末端属于同种限制性核酸内切酶切割而成的是(    )。

某线性DNA分子含有3  000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是(    )。

A.在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个
B．a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接
C．a酶与b酶切断的化学键分别为磷酸二酯键和氢键
D．用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，序列会明显增多

检测转基因生物是否转录出mRNA，应通过何种分子杂交方法实现(    )。

在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是(    )。

现有一长度为1000碱基对(bp)的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRⅠ单独酶切后得到的DNA分子仍是1000  bp，用Kpn  Ⅰ单独酶切得到400  bp和600  bp两种长度的DNA分子，用EcoR  Ⅰ、Kpn  Ⅰ同时酶切后得到200  bp和600  bp两种长度的DNA分子，该DNA分子的酶切图谱(如图所示)正确的是(    )。

下列技术依据DNA分子杂交原理的是(    )。
①观察DNA在细胞中的分布  ②检测目的基因是否导入细胞  ③检测目的基因是否翻译  ④检测目的基因是否进行转录

下图表示从苏云金芽孢杆菌分离出来的杀虫晶体蛋白质基因(简称Bt基因)及形成转基因抗虫棉的图解。请据图回答下面的问题。

(1)图中a过程要用到的酶是_______________________________________。
(2)在进行图中b过程时，由我国科学家独创的十分简便经济的方法是________，此外，也经常采用________法。若要培育转基因绵羊，则此过程要用________的方法。
(3)为确定抗虫棉是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交测试，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是_________________________________________________________________。
(4)活化的毒性物质应是一种________分子，可以全部或部分嵌合于昆虫的细胞膜上，使细胞膜产生孔道，导致细胞由于渗透平衡的破坏而破裂。
(5)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉、抗虫水稻等研究，可以减少农药、杀虫剂的使用。这将对________起到重要作用。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。

(1)若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体，则该基因表达载体的组成通常应包括____________________等。
(2)科学家常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术检测目的基因是否插入番茄的基因组。
(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸，从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期，请用文字描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。
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肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

图1

图2
请回答有关问题。
(1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let7基因。
(2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
(3)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS  mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。